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Todos los datos generados y/o analizados durante este estudio se incluyen en este artículo publicado. Los datos del microbioma se han subido al Archivo Europeo de Nucleótidos (ENA) (acceso primario # PRJEB34170) https://www.ebi.ac.uk/ena/submit/sra/#studies.
Todos los estudios con animales fueron aprobados por el Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales (IACUC) en un centro de investigación contratado en Fort Collins, CO (Protocolo # 170 024). Los perros Beagle criados a propósito para estos estudios se compraron a un proveedor comercial. Tras la finalización de los estudios, todos los perros fueron adoptados por propietarios locales en el área de Ft. Collins.
Acceso abierto Este artículo se distribuye bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution 4.0 International License (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), que permite su uso, distribución y reproducción sin restricciones en cualquier medio, siempre que se dé el crédito correspondiente al autor o autores originales y a la fuente, se proporcione un enlace a la licencia Creative Commons y se indique si se han realizado cambios. La renuncia a la Dedicación de Dominio Público de Creative Commons (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) se aplica a los datos puestos a disposición en este artículo, a menos que se indique lo contrario.
Formación de liposomas
La línea celular productora de luz A549-luc-C8, derivada de células humanas de carcinoma pulmonar de células no pequeñas A549 mediante transfección estable del gen Firefly Luciferase norteamericano expresado a partir del promotor CMV, se obtuvo de Xenogen Corporation (Alameda, California). Las células se cultivaron en medio RPMI, complementado con un 10% de suero fetal bovino (Fisher Chemicals, Fairlawn, NJ). Las células se cultivaron a 37°C en una atmósfera humidificada de 5% de CO2 (v/v) en aire. Todos los experimentos se realizaron con células en fase de crecimiento exponencial.
Los ratones nu/nu atímicos de 6-8 semanas de edad se obtuvieron de Taconic (Hudson, NY). Todos los ratones se mantuvieron en jaulas microaisladas en condiciones libres de patógenos en las instalaciones de mantenimiento de animales de Rutgers, la Universidad Estatal de Nueva Jersey.
Se utilizaron liposomas “neutros” con PEG para la administración de DOX y P-etoxi ASO eléctricamente neutros. El ARNsi cargado negativamente se administró mediante liposomas DOTAP catiónicos. Los ASO dirigidos al ARNm de BCL2 fueron sintetizados y marcados con isotiocianato de fluoresceína (FITC) por Oligos Etc. (Wilsonville, OR) según nuestro diseño (29). La columna vertebral del ADN de todas las bases de los oligonucleótidos fue modificada con P-etoxi para eliminar una carga eléctrica y aumentar la eficacia de la incorporación en liposomas “neutros”. Se adquirió un indicador de transfección siGLO Red (dúplex de ARN marcado con el fluoróforo Pierce NuLight DY-547) de Dharmacon Inc. (Chicago, IL) y se utilizó para estudiar la entrega de ARNsi y la captación celular. La doxorrubicina se compró a Sigma (St. Louis, MO).
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6. Una composición según la reivindicación 4 o la reivindicación 5, en la que los liposomas contienen uno o más componentes adicionales seleccionados entre estearato de colesterol y un componente cargado negativa o positivamente.
11. Una suspensión acuosa que comprende una concentración tota de 0. 1 a 20 mg/ml de sodiun cromoglicato repartida entre una fase acuosa y una fase liposomal, comprendiendo la fase liposomal una o más de las lecitinas di (tetradecanoil)fosfatidilcolina di – (hexa decanoil)fosfatidilcolina o di – (octa decanoil)fosfatidilcolina, donde la concentración de la lecitina dispersa en la fase acuosa es de 1 a 30 mg/ml y el porcentaje de cromoglicato de sodio asociado a los liposomas es de 2 a 35% en peso.
COMPOSICIÓN A BASE DE FASES LÍPIDAS HIDRATADAS O LIPOSOMAS QUE CONTIENEN EXTRACTO DE ESCUTELARIA, O AL MENOS UN FLAVONOIDE COMO LA BAICALINA O LA BAICALINA Y COMPOSICIÓN COSMÉTICA O FARMACÉUTICA, EN PARTICULAR DERMATOLÓGICA, CON ACTIVIDAD ANTIALÉRGICA EL INCORPORANTE
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ResumenUna serie de N-glicanos, cada uno de ellos recortado secuencialmente a partir de sialoglicanos biantenarios, se agruparon homo o heterogéneamente de forma eficiente en albúmina fluorescente utilizando un método que combinaba la ciclización alquino-azídica promovida por la cepa y la 6π-azaelectrociclación. La cinética no invasiva in vivo y el análisis de disección revelaron, por primera vez, un cambio dependiente de los glicanos de la excreción urinaria a la de la vesícula biliar mediado por el recorte secuencial de los ácidos siálicos finales no reductores. Las N-glycoalbuminas que se recortaron aún más, en particular, los congéneres terminados en GlcNAc y los híbridos biantenarios, fueron captados selectivamente por las células endoteliales sinusoidales y las células estrelladas del hígado, que son fundamentales para el diagnóstico y el tratamiento de la fibrilación hepática. Nuestra estrategia de glicoclústeres no sólo puede revelar las funciones extracelulares hasta ahora inexploradas del recorte de N-glicanos, sino que se clasificará como las nuevas glicoprobetas emergentes para aplicaciones diagnósticas y terapéuticas.
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